pcr引物的特点

PCR的基本原理是以拟扩增的DNA分子为模板，以一对分别与模板，末端相互补的寡核苷酸片段为引物，在DNA聚合酶的作用下，按照半保留复制的机制沿着模板链延伸直至完成新的DNA合成，不断重复这一过程，即可使目的DNA片段得到扩增。

PCR是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火(复性)及适温延伸等反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。

PCR技术的原理是利用碱基互补配对的原则，把体内基因的复制在体外进行，从而得到大量的目的基因。主要原理如下：双链DNA分子在临近沸点的温度下加热时便会分离成两条单链的DNA分子，然后DNA聚合酶以单链DNA为模板，并利用反应混合物中的四种脱氧核苷三磷酸（dNTP）合成新的DNA互补链。此外，DNA聚合酶同样需要一小段双链DNA来启动“引导”新链的合成，因此新合成的DNA链的起点事实上是由加入在反应混合物中的一对寡核苷酸引物在模板DNA两端的退火位点决定的。在为每一条链均提供一段寡核苷酸引物的情况下，两条单链DNA都可以作为合成新生互补链的模板，因为在PCR反应中所选用的一对引物是按照与扩增区段两端序列彼此互补的原则设计的，因此每一条新生链的合成都是从引物的退火结合位点开始，并沿着相反(5’→3’方向)方向延伸。如此变性、复性、延伸三个过程反复循环，产生了目的片断的大量克隆。

PCR技术是模仿体内的条件，使基因扩增，所以在扩增体系中需要有DNA聚合酶、一定的pH值的缓冲液、要扩增的目的基因（模板），起始扩增的DNA目的片断的引物，及扩增需要的原料（四种三磷酸脱氧核糖核苷酸），Mg2+,DNA复性、变性及延伸温度与时间等。