基因工程的主要技术及其原理有哪些

基因工程的原理：

首先，明确DNA是遗传物质，而不是蛋白质。接着，沃森克里克提出了DNA双螺旋假说，明确了DNA的分子结构。在此基础上，提出了中心法则，清楚了DNA，RNA，蛋白质之间的关系。最后，对密码子的解析，让我们知道了基因密码。这些理论假说共同构建了基因工程的理论基础。

基因工程的技术：

最重要的是一些列工具酶的发现及应用。其中最重要的是三种：1，一系列限制性内切酶的发现，这些酶的功能是特异识别DNA序列并在特定的位置DNA切断，就像剪刀，按照我们的需求将DNA片段剪成我们需要的片段；2，连接酶，它的作用是将剪断的DNA片段重新连接起来；3，DNA聚合酶，它是DNA合成酶，目的是复制出大量我们想要的DNA片段。有了这三种酶我们就能大量产生我们想要的DNA片段（其实就是我们感兴趣的基因）。当然，在构建这些基因时，我们还行借助一些电泳、测序这些技术，保证我们构建的目的基因是正确

之后，我们还需要将我们我们的基因导入到生物体内。这就需要一个载体，一方面将我们的基因导入到细胞内，另一方面对我们导入细胞的基因保护起来，能够在细胞中稳定，（并可以表达）。这些载体应用最广泛的有大肠杆菌的质粒，噬菌体等。这个过程中设计到转化技术。如此，我们就能构建出我们想要的基因，并将他导入到大肠杆菌，噬菌体等生物体中进行基因的表达。若是想将基因在高等植物或动物中表达，还需借助相应的技术手段将目的基因整合到他们的基因组中，最后可以在他们体内表达我们的目的基因。

　　基因工程（genetic engineering）又称基因拼接技术和DNA重组技术，是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。基因工程技术为基因的结构和功能的研究提供了有力的手段。　　操作工具　　（1）酶：限制性核酸内切酶、DNA连接酶。　　（2）载体：质粒载体、噬菌体载体、Ti质粒、人工染色体。