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朗伯–比尔定律，是物质吸收光辐射时所遵循的定律。
当吸收谱带较窄的非强光（理论上是平行的单色光）通过均匀的低浓度吸光物质（如稀溶液）时，未被吸收而透过吸光物质的光的强度A（吸光度）遵从下列关系：A＝lg(I0/I)＝εlc
式中I0为入射单色光强度；I为透射光强度；c为吸光物质浓度；l为吸光物质厚度；ε为吸光物质的摩尔吸光系数，是物质浓度为1摩/升、吸收层厚度为1厘米时溶液的吸光度，其数值与入射光波长、吸光物质性质、溶剂性质及温度有关。ε表示物质分子对特定波长光的吸收能力，值越大，分光光度测定的灵敏度越高；当波长一定时（一般是在最大吸收波长处），ε由分子吸收截面积S和跃迁概率P决定：ε＝8.7×1019PS朗伯–比尔定律是分光光度法的测定基础。其成立条件是待测物为均一的稀溶液、气体等，无溶质、溶剂及悬浊物引起的散射。
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