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肌酸激酶(CK)的活性计算公式主要根据化学反应式进行计算。首先,我们需要了解CK的化学反应式:ATP + H₂O → ADP + Pi + 2H⁺ + 2H₂O。
这个反应式中,ATP是三磷酸腺苷,ADP是二磷酸腺苷,Pi是无机焦磷酸,H⁺是氢离子,H₂O是水。
在计算CK活性时,我们通常会使用以下公式:
CK活性 = (ΔA/min × 1000) / (Aₘₐₓ/L × 1/6 × Tₘₐₓs)
这个公式中,ΔA/min是指在特定时间内(通常是1分钟内)反应中A的减少量(A是ATP的浓度)。Aₘₐₓ/L是底物(ATP)的浓度,Tₘₐₓs是反应时间(以秒为单位)。
需要注意的是,这个公式仅适用于计算CK活性的一般情况。对于特定实验条件或特定样本,可能需要使用不同的计算公式或方法。因此,在进行CK活性计算时,建议参考相关文献或咨询专业人士以获取准确的结果。
12小时前
灯影桨声 5星
共回答了52个问题 评论
CK 活性计算公式:
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
(1)按组织蛋白含量计算
酶活定义:37℃,pH7.0时,每毫克蛋白质1min内催化产生1nmol NADPH为一个酶活单位。
CK 活性(nmol/min/mg prot)=△A÷e÷d×V 反总÷(V 样×Cpr)= 804×△A÷Cpr
(2)按组织样本质量计算:
酶活定义:37℃,pH7.0时,每克样品1min内催化产生1nmol NADPH为一个酶活单位。
CK 活性(nmol/min/g)=△A÷e÷d×V 反总÷(V 样÷V 样总×W)= 804×△A÷W
(3)按血清计算:
酶活定义:37℃,pH7.0时,每升血清1min内催化产生1nmol NADPH为一个酶活单位。
CK 活性(nmol/min/L)=△A÷e÷d×V 反总÷V 样×1000= 804000×△A
e:NADPH 微摩尔消光系数,6220 L/mol/cm;d:比色皿光径,1cm;V 反总:反应体系总体积,
0.3mL;V 样:反应体系中样本体积,0.06mL;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本质量,
测定原理:
CK催化磷酸肌酸和ADP生成肌酸和ATP,己糖激酶催化ATP与葡萄糖形成6-磷酸葡萄糖,6- 磷酸葡萄糖脱氢酶催化6-磷酸葡萄糖与NADP
+生成NADPH,导致340nm光吸收值增加。
自备实验用品及仪器:
天平、低温离心机、恒温水浴锅、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板和蒸
馏水。
11小时前
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