电泳缓冲液怎么配制

电泳缓冲液的配制方法

1、MOPS

MOPS Buffer，即3-ma啉丙磺酸缓冲液，属于生物缓冲剂，可作为二维凝胶电泳中等电聚焦电泳（IEF）的电解质系统成分；还可应用于Northern杂交，作为RNA的分离和转膜时的缓冲液。

常用的10×MOPS Buffer配制方法如下：

（1）称量41.8 g MOPS，溶解于约700mL DEPC处理水中；

（2）使用2 N NaOH 调节pH值至7.0；

（3）向溶液中加入DEPC处理的1M NaOAC 20mL、0.5M EDTA(pH8.0) 20mL；

（4）定容至1 L，用0.45 μm 滤膜过滤除去杂质，室温避光保存。

2、TAE

TAE是使用最广泛的缓冲系统。其特点是超螺旋在其中电泳时更符合实际相对分子质量（TBE中电泳时测出的相对分子质量会大于实际分子质量），且双链线状DNA在其中的迁移率较其他两种（TAE和TBE）缓冲液快约10%，电泳大于13kb的片段时用TAE缓冲液将取得更好的分离效果，此外，回收DNA片段时也易用TAE缓冲系统进行电泳。

50×TAE Buffer 配制方法：

1。称量Tris 242g，EDTA 18.612g于1L烧杯中；

2。向烧杯中加入约800ml去离子水，充分搅拌均匀；

3。加入57.1ml的冰乙酸，充分溶解；

4。用NaOH调pH至8.3，加去离子水定容至1L后，室温保存。

使用时稀释50倍或100倍 即1×TAE Buffer 或 0.5×TAE。

3、TBE

TBE（Trispeng酸），是一种PCR技术中用到的缓冲液。

TBE配方：

1、使用液（0.5×）

0.045mol/L Tris- peng酸 0.001mol/L EDTA 采用无菌水溶解混匀，溶液体积为1L。

2、浓贮存液（5×）

54gTris碱 27.5g peng酸 20ml 0.5mol/L EDTA 采用无菌水溶解混匀，NaOH调pH至8.0，溶液体积1L。