illumina测序原理

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Illumina测序原理主要包括以下几个步骤：

文库片段附着到“flowcell上的oligo”：DNA文库两头的序列和芯片上的引物碱基互补，因此可以通过氢键力互补杂交。待测序的DNA片段通过氢键力与第一种oligo配对从而固定在flowcell上。

被文库片段附着的oligo延伸出互补的DNA链：加入DNA聚合酶和dNTP，flowcell上的oligo做引物，以文库片段为模版，合成出一条全新的DNA链（和原来的文库片段序列完全互补）。

冲走文库片段：加入NaOH碱溶液，破坏氢键力，模版链（文库片段）被冲走，只剩下与芯片通过共价键连接的DNA链。

扩增：使用高通量测序仪对DNA链进行扩增，得到测序结果。

以上是测序的基本原理，具体操作还会受到测序仪的型号、测序的序列、测序的数据分析方法等多种因素的影响。

5小时前

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